如何用濾膜法測細(xì)菌總數(shù)-集菌儀
基于濾膜上細(xì)菌直接計(jì)數(shù)法的細(xì)菌總數(shù)快速檢測
【摘要】 細(xì)菌總數(shù)快速檢測在質(zhì)量監(jiān)測中具有重要的意義,目前除了經(jīng)典的平板培養(yǎng)法以外,還有微菌落法、阻抗法等快速檢測方法,這些方法或者需要較長的檢測時(shí)間,或者需要較高的檢測成本。本研究提出一種不需要培養(yǎng)而在濾膜上直接計(jì)數(shù)的細(xì)菌總數(shù)的快速檢測方法,它主要分為過濾、染色、顯微鏡計(jì)數(shù)和計(jì)算四個(gè)步驟。計(jì)算細(xì)菌總數(shù)時(shí),根據(jù)細(xì)菌在濾膜上的分布特點(diǎn),對傳統(tǒng)公式進(jìn)行改進(jìn),提出按區(qū)域計(jì)算細(xì)菌總數(shù)的計(jì)算方法,提高了檢測精度。研究結(jié)果表明,該方法與傳統(tǒng)的平板培養(yǎng)法無顯著性差異(t=0.847,P=0.436>0.05),是一種低成本、快速的細(xì)菌總數(shù)檢測方法。
1 引 言
細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)的研究已有很多,目前國標(biāo)規(guī)定的方法為平板計(jì)數(shù)法,該方法是將樣品加入瓊脂營養(yǎng)基,在37 ℃下培養(yǎng)24~48 h后計(jì)數(shù)。這種方法精度高,但耗時(shí)長,難以滿足實(shí)際工作需要。為了簡化檢測程序、縮短檢測時(shí)間,國內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了大量的快速檢測方法的研究,提出了阻抗檢測法〔1〕、Simplate TM全平器計(jì)數(shù)法〔2〕、微菌落技術(shù)〔3-5〕、紙片法〔6-7〕等檢測方法,取得了的成果,但檢測時(shí)間仍在4 h以上。
本研究在分析了已有研究成果的基礎(chǔ)上,提出了在濾膜上染色后,直接計(jì)數(shù)的細(xì)菌總數(shù)檢測方法,具體步驟為:用集菌儀進(jìn)行細(xì)菌收集→在膜上進(jìn)行染色→在油鏡下計(jì)數(shù)→按公式計(jì)算出菌液濃度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,該方法與傳統(tǒng)的平板培養(yǎng)法無顯著性差異,檢測時(shí)間約1 h,是一種快速的細(xì)菌總數(shù)檢測方法。
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