欧美最猛性xxxxx(亚洲精品),久久九九免费视频,中文字幕人妻高清乱码,999国内精品永久免费观看

您好!歡迎訪問杭州聚同電子有限公司網(wǎng)站!
全國服務(wù)咨詢熱線:

18757562850

當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > SPE固相萃取儀器裝置

SPE固相萃取儀器裝置

更新時(shí)間:2015-01-15      點(diǎn)擊次數(shù):2002

SPE固相萃取技術(shù)(固相萃取儀器裝置)(二)

固相萃?。⊿olid Phase Extraction,簡稱SPE)技術(shù),發(fā)展于上世紀(jì)70年代,由于其具有、可靠、消耗試劑少等優(yōu)點(diǎn),在許多領(lǐng)域取代了傳統(tǒng)的液-液萃取而成為樣品前處理的有效手段。

       一些傳統(tǒng)的介紹SPE的書籍將其歸于一個(gè)液相色譜的原理,這其實(shí)是引起使用不當(dāng)?shù)闹饕从芍?。把SPE小柱看作一根液相色譜柱,不如把它看成單純的萃取劑更合適,因?yàn)椋阂合嗌V的重點(diǎn)在于分離,而SPE的重點(diǎn)在于萃取。固相萃取技術(shù)在樣品處理中的作用分兩種:一是凈化,二是富集,這兩種作用可能同時(shí)存在。

固體萃取和液-液萃取相比,其長處在于方便和消耗試劑少,短處在于批次間的重復(fù)性難以保證。出現(xiàn)這種情況的原因在于:液體試劑的重復(fù)性好,只要其純度可靠,不同年代的產(chǎn)品的物理化學(xué)性質(zhì)都是可靠的。而固體萃取劑就算保證了純度外,還存在著顆粒度的差異,外形的差異等液體試劑不存在的且難以衡量的因素,不同年代不同批號(hào)的萃取性質(zhì)可能會(huì)有較大的區(qū)別。

      從理論上和廠家宣傳來看,固相萃取應(yīng)該在色譜分析的前處理上得到很好的應(yīng)用:有機(jī)溶劑用得很少,可批量處理樣品,既可富集,又能除雜質(zhì),給人印象是前處理的革命性進(jìn)步。然而現(xiàn)實(shí)情況,起碼在國內(nèi),雖然推廣了多年,實(shí)際應(yīng)用還是相當(dāng)有限。

     SPE應(yīng)用得不廣,與我們的使用方式和期望有關(guān),也與它本身的局限有關(guān)。對(duì)于供應(yīng)商來說,從經(jīng)濟(jì)利益出發(fā),向來都是忽略固相萃取的局限與不足。固相萃取可以作為前處理手段的一個(gè)很好補(bǔ)充,但是在使用時(shí),一定要清醒知道到它的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn),注意因地制宜,揚(yáng)長避短。

固相萃取理論

反相固相萃取

反相分離包括一個(gè)極性或中等極性的樣品基質(zhì)(流動(dòng)相)和一個(gè)非極性的固定相。分析物通常是中等極性到非極性。幾種SPE材料屬于反相類,如烷基,或芳香基鍵合的硅膠(LC-18,ENVI-18,LC-8,ENVI-8,LC-4,和LC-Ph)。在這里,純硅膠(一般孔徑為60—40mm大小的顆粒)表面的親水性硅醇基通過硅烷化學(xué)反應(yīng),被含有疏水性的烷基或芳香基取代了。

    由于分析物中的碳?xì)滏I同硅膠表面官能團(tuán)的吸附作用,使得極性溶液(例如,水)中的有機(jī)分析物能保留在這些SPE物質(zhì)上。這種非極性-非極性吸附力通常稱為范德華力或色散力。為了從反相SPE管或片上洗脫被吸附的化合物,一般采用非極性溶劑去破壞這種化合物被吸附到填充物質(zhì)上的力。LC-18和LC-8是標(biāo)準(zhǔn)的單鍵合硅膠,而ENVI-18和ENVI-8則屬于聚合鍵合類填料,具有很高的硅表面覆蓋率和較高的碳含量。這類聚合鍵合類填料具有更強(qiáng)的抗酸堿性,因而更適合于環(huán)境應(yīng)用,如從酸化的液體樣品中富集有機(jī)化合物。所有使用過的鍵合硅膠相都有一定數(shù)量的未反應(yīng)硅醇基,它將成為二級(jí)相互作用之源。在萃取或保留強(qiáng)極性分析物或污染物時(shí),這種二級(jí)相互作用是非常有用的,但是對(duì)分析物的吸附也可能是不可逆。

以下物質(zhì)也用于反相條件:ENVI-Carb(碳),ENVI-Chrom P(聚合類)和Hisep(聚合涂層的鍵合硅膠)。含碳的吸附物質(zhì),如ENVI-Carb材料,是由石墨和無孔碳組成,它對(duì)極性和非極性樣品中的極性和非極性有機(jī)化合物有較高的吸附能力。該碳表面是正六圓環(huán)的原子結(jié)構(gòu),每個(gè)碳原子在石墨層上相互聯(lián)接。這種正六圓環(huán)結(jié)構(gòu)對(duì)某些分子有很強(qiáng)的選擇性,比如平面型芳香化合物或類正六圓環(huán)分子和可形成許多表面觸點(diǎn)的烴鏈分子。分析物的保留取決于其結(jié)構(gòu)(形狀和大?。皇瞧渖瞎倌軋F(tuán)與吸附劑表面的相互作用。洗脫時(shí),使用中等極性到非極性溶劑。與烷基鍵合硅膠相比,尤其是在鍵合硅膠不靈時(shí),ENVI-Carb顯示出*的結(jié)構(gòu)和選擇性優(yōu)勢(shì)。

聚合類吸附物質(zhì),如ENVI-Chrom P是苯乙烯-二乙烯基苯物質(zhì),用之保留一些含有親水性官能團(tuán)的疏水性化合物,尤其是芳香型化合物。有時(shí)在反相條件下,苯酚很難保留在C18鍵合硅膠上,這主要是因?yàn)樗谒械娜芙舛却笥谟袡C(jī)相。而ENVI-ChromP在反相條件下可很好地保留苯酚。洗脫時(shí),使用中等極性到非極性溶劑,這是因?yàn)?,聚合類填料?duì)所有的溶劑都是很穩(wěn)定的。

Hisep是一個(gè)疏水基(類似C18)鍵合硅膠涂上一層親水聚合物,常用于反相條件,這種有孔的聚合物能阻止不需要的大分子被吸附到硅膠表面。聚合物的孔徑大小只充許所分析的疏水性有機(jī)小分子化合物(如藥物)接近硅膠表面,而不需要的大分子(如蛋白質(zhì))則被聚合物層隔離在外,沒有機(jī)會(huì)接近硅膠表面,并被沖洗出固相萃取管。Hisep固相萃取過程類似于LC-18固相萃取過程。

正相固相萃取

正相固相萃取包括了一個(gè)極性分析物質(zhì)、中等極性到非極性的物質(zhì)(如丙酮,鹵化溶劑和正己烷)和二個(gè)極性固定相。極性官能團(tuán)鍵合硅膠(如LC-CN,LC-NH2和LC-Diol)和極性吸附物質(zhì)(如LC-Si,LC-Florisil,ENVL-Florisil和LC-Alumina)常用于正相條件。在正相條件下,分析物如何保留取決于分析物的極性官能團(tuán)與吸附劑表面的極性官能團(tuán)之間的相互作用,具體包括氫鍵、相互作用、偶極一偶極相互作用和偶極-誘導(dǎo)偶極相互作用及其它。因此,由以上幾種機(jī)理所吸附的分析物,應(yīng)用比樣品本身更極性的溶劑去破壞其相互作用,這樣分析物才隨之而洗脫。

鍵合硅膠LC-CN、LC-NH2和LC-Diol,有一個(gè)帶有極性官能團(tuán)的較短烷基鏈鍵合在硅膠表面上。因?yàn)闃O性官能團(tuán)的存在,這種硅膠相對(duì)于反相硅膠更具有親水性。常用的正相硅膠,它能從非極性的樣品中吸附極性化合物。這種固相萃取管已用于吸附和選擇性洗脫結(jié)構(gòu)很類似的化合物(如異構(gòu)體)、復(fù)雜的混合物或者象藥物和脂類化合物。為了利用它這種疏水性,它也可用于反相條件(如水溶液樣品)。

LC-Si填料是一種沒有衍生的硅膠,一般用來作所有鍵合硅膠的基體。這種硅膠極親水,必須保持干燥,這就要求所分析的樣品必需無水。硅膠用于從非極性物質(zhì)中吸附化合物官能團(tuán)的都是表面自由羥基。LC—Si從非極性物質(zhì)中吸附極性化合物,然后用一種極性更強(qiáng)的有機(jī)溶劑洗脫。多數(shù)情況下,LC-Si是作為一種吸附劑,當(dāng)硅膠基體用于有機(jī)萃取時(shí),分析物不停留在硅膠上,而不要的化合物則被吸附在硅膠上,隨之扔掉。這種過程稱為樣品前處理。

LC-Florisil和ENVI-Florisil固相萃取是一個(gè)鎂化硅膠,通常用在樣品的有機(jī)萃取,用其進(jìn)行有機(jī)樣品的前處理。它是一種強(qiáng)極性物質(zhì),可以有效地從非極性物質(zhì)中吸附極性化合物。ENVI-Florisil固相萃取是由聚四氟乙稀或者不銹鋼濾片制作。這種對(duì)環(huán)境過程非常重要的結(jié)構(gòu)祥述在美國環(huán)境保護(hù)組織的方法中。ENVI-Florisil己用氣相色譜分析法測(cè)定其背境較小。

LC-Alumina固相萃取用于吸附和樣品前處理的過程,Al2O3材料可為酸性(Al2O3-A, pH約為5)、堿性(Al2O3-B, pH約為8.5)或者中性(Al2O3-N pH,約為6.5)。Al2O3的活性水平隨水加入的多少,從1級(jí)到5級(jí)而變化,裝管時(shí),Al2O3可在裝管前預(yù)處理或者裝管后再處理。

離子變換固相萃取

離子交換固相萃取適用于帶有電荷的化合物(一般為水溶液,也有有機(jī)溶液)。陰離子(負(fù)電荷)化合物可用LC-SAX或LC-NH2鍵合硅膠管進(jìn)行分離;陽離子(正電荷)化合物可用LC-SCX或LC-WCX鍵合硅膠管進(jìn)行分離?;驹硎庆o電吸引,也就是化合物上的帶電電荷基團(tuán)與鍵合硅膠上的帶電電荷基團(tuán)之間的吸引。為了從水溶液中將化合物吸引到離子交換樹脂上,樣品的pH值一定要保證其分離物的官能團(tuán)和鍵合硅膠上的官能團(tuán)均帶電荷。如果某種離子帶有與分析物一樣的電荷,它將會(huì)干擾分析物的吸附。當(dāng)然這種情況也可能是罕見的。洗脫溶液一般是其pH值能中和分離物官能團(tuán)上所帶電荷,或者中和鍵合硅膠上官能團(tuán)所帶電荷。當(dāng)官能團(tuán)上的電荷被中和,靜電吸引也就結(jié)束,分析物則隨之洗脫。另外,洗脫溶液也可能是一種其離子強(qiáng)度很大或含有另一種離子能取代被吸附的化合物,這樣被吸附的化合物也隨之而洗脫。

陰離子交換

LC-SAX是一種脂肪族季銨類鹽鍵合在硅膠上的物質(zhì),季銨鹽是一種很強(qiáng)的堿,帶有一個(gè)正電荷,能交換或吸附溶液中的陰離子,稱之為陰離子交換(SAX)。季銨鹽的pH值很高(>14),在水溶液中,所有的pH條件下,都能帶上電荷。這樣LC-SAX可分離很強(qiáng)的陰離子化合物(很低的pH值,<1)或弱陰離子化合物(中等的pH值,>2),只要樣品在其pH條件下,分析物帶有電荷即可。對(duì)于陰離子分析物(酸性),為使之帶上電荷,其pH值必需大2個(gè)單位。大多數(shù)情況下,被分析物是強(qiáng)酸性的或弱酸性的。

因?yàn)榛衔锉晃降厝绱酥o,只有在不要求其陰離子回收率時(shí)(化合物被分離,然后扔掉),才能用LC-SAX萃取強(qiáng)陰離子。弱陰離子則能用LC-SAX分離,因?yàn)樗鼈兡鼙涣硗庖环N陰離子所取代或者被一種酸性溶液所洗脫,該酸性溶液的pH值可中和被取代的陰離子(pH小2個(gè)單位)。如果要求強(qiáng)陰離子其回收率時(shí),可選用LC-NH2。

LC-NH2固相萃取填料適用于正相分離,當(dāng)用于水溶液時(shí)也做為一種弱陰離子交換樹脂(WAX)。LC-NH2填料含有一個(gè)脂肪族季氨丙基,并鍵合在硅膠表面上。這種伯胺基的pH值大約為9.8。因?yàn)槠溆糜陉庪x子交換,樣品的pH值必需小于9.8至少2個(gè)單位,此pH還必需保證所分析的陰離子化合物帶上電荷(比其pH值大2個(gè)單位)。LC-NH2也可適用于強(qiáng)陰離子或弱陰離子分離回收,這是因?yàn)楣枘z表面的氨基能被中和強(qiáng)陰離子或弱陰離子(比其pH大2個(gè)單位),這樣強(qiáng)陰離子或弱陰離子都能被洗脫。弱陰離子也能用一種溶液(pH比該陰離子的pH?。矀€(gè)單位)而洗脫,或者加入另外一種陰離子取而代之。

陽離子交換

LC-SCX填料含有一個(gè)脂肪族磺酸基,并鍵合在硅膠表面上。這種磺酸基有很強(qiáng)的酸性(pH值<1),它能吸附或者交換溶液的陽離子,稱之為強(qiáng)陽離子交換(SCX)。在所有的pH條件下,這種鍵合官能團(tuán)都能帶有電荷,只要該pH能保證所分析化合物帶有電荷,因此其能用于強(qiáng)陽離子(pH值>14)或弱陽離子(pH值<12)化合物的分離。對(duì)于所分析的陽離子(堿性)化合物,樣品的pH要比其pH值小2個(gè)單位,以保正其帶電荷。多數(shù)情況下,所分析的化合物是強(qiáng)堿性的或弱堿性的。

當(dāng)不要求強(qiáng)陽離子回收或者被洗脫時(shí),LC-SCX固相萃取管可用于強(qiáng)陽離子的分離。弱陽離子則可以用LC-SCX分離和洗脫。洗脫時(shí),用一種pH比其pH大2個(gè)單位的溶液(中和分析物的電荷),或者加入另外一種陽離子取而代之。如果要求強(qiáng)陽高子回收率,可選用LC-WCX。

LC-WCX固相萃取填料含有一個(gè)脂肪族羧酸基團(tuán),并鍵合在硅膠表面上。這種羧基是一種弱酸性陰離子,所以它可作為一種弱性陽離于交換(WCX)。LC-WCX上羧基的pH約為4.8。當(dāng)pH比其pH大2個(gè)單位時(shí),它保持帶負(fù)電荷,能分離此pH下帶電荷的陽離子。LC-WCX適用于強(qiáng)陽離子或弱陽離子分離和回收,因?yàn)楣枘z表面的羧基能被中和(pH比其pH小2個(gè)單位),強(qiáng)陽離子或者弱陽離子則被洗脫。對(duì)于弱陽離子可用一種溶液(pH比陽離子pH大2個(gè)單位)中和而洗脫,或者加入另外一種陽離子取而代之。

在很多情況下,由離子交換固相萃取所吸附的分析物被洗脫在水溶液中。如果必需使用酸性溶液或者堿性溶液去洗脫固相萃取管上的分析物,同時(shí)分析物又必需以有機(jī)溶劑來分析,而有機(jī)溶劑又不溶于水,這時(shí)可根據(jù)情況,試用含有酸的甲醇(98%甲醇、2%濃鹽酸)或者含有堿的甲醇(98%甲醇、2%氫氧化氨)來洗脫。由于甲醇很容易揮發(fā),樣品可再溶解在另一種溶劑里。如果需要一個(gè)很強(qiáng)(非極性)的溶劑從固相萃取填料上去洗脫所分析物,可加一些二鹵甲烷、正己烷、乙酸乙脂到酸或堿性的甲醇里。

二級(jí)相互作用

以上詳述了化合物在固相萃取方法中是如何保留的基本原理。對(duì)鍵合硅膠可能有二級(jí)相互作用的存在。

對(duì)反相鍵合硅膠,基本原理是非極性的相互作用。然而,由于硅膠只是主體,有一少部分硅甲醇存在,這就有一些極性二級(jí)相互作用(正如我們?cè)谡喙滔噍腿∪∷劊⒁l(fā)生。如果非極性溶劑不能有效地從反相固相萃取填料上洗脫化合物,就有必要加些極性溶劑(如甲醇),以破壞極性相互作用而保留的化合物。在這種情況下,甲醇與硅膠上的羥基形成氫鍵, 打斷了分析物與硅膠上的羥基形成的氫鍵。

硅甲醇在硅膠表面,Si-OH,也可為酸性,當(dāng)pH大于4時(shí),以Si-O-型式存在。這時(shí)在硅膠基體上也可能發(fā)生陽離子交換的二級(jí)相互作用,能吸附陽離子或堿性分析物。在這些情況,調(diào)整洗脫溶液的pH非常重要,以破壞這些相互作用而洗脫分析物(酸中和硅甲醇或堿中和分析物)??蛇x用含有酸的甲醇(98%甲醇、2%濃鹽酸)或者含有堿的甲醇(98%甲醇、2%濃氫氧化氨),或者用一種熔于甲醇的非極性有機(jī)溶劑來洗脫。

正相鍵合硅膠通過其鍵合基團(tuán)展示了極性保留機(jī)理,但是也有一些二級(jí)相互作用發(fā)生在分析物與聯(lián)接鍵合基團(tuán)的烷基鏈之間。在這種情況下,更非極性的溶劑或極性—非極性混和溶劑可用來做洗脫溶劑。作為反相鍵合硅膠,硅膠基體與分析物之間的二級(jí)相互作用和陽離子交換作用也可能發(fā)生。

離子交換鍵合硅膠不僅能提供這種分析物與硅膠上部分非極性基團(tuán)之間的非極性二級(jí)相互作用,而且還有分析物與硅膠基體之間的極性和陽離子交換作用。要從這些填料上洗脫分分析物,一個(gè)準(zhǔn)確的pH、離子強(qiáng)度和有機(jī)物的含量是必要的。

固相萃取中的PH影響

用在固相萃取中的溶液有很大pH范圍的溶液有。硅膠作為基體原料,如高壓液相色譜柱,通常穩(wěn)定的pH范圍是2-7.5。當(dāng)pH高于和低于這個(gè)范圍,鍵合相就會(huì)水解和從硅膠上斷鏈下來,或者硅膠本身就溶解了。然而,在固相萃取中,常常溶液只與吸附劑接觸較短的時(shí)間。實(shí)際上固相萃取管都是一次性使用,允許任何pH溶液以達(dá)到*保留和洗脫效果。如果固相萃取管對(duì)pH極限的穩(wěn)定性非常重要時(shí),聚合或碳鍵合固相萃取材料均可選用,如ENVI-Chrom P或ENVI-Carb。這些材料在1-14pH范圍內(nèi)都是穩(wěn)定的。

對(duì)于鍵合硅膠上反相固相萃取過程,如果希望保留分析物,預(yù)處理的溶液和樣品(基本上或全部為水溶液)的pH應(yīng)調(diào)至zui適宜分析物保留。如果,分析物是酸或堿性的,通常情況下,使用的pH應(yīng)該阻止化合物帶電荷。中性化合物(無酸性和堿性基團(tuán))的保留,一般不受pH影響。相反,也能調(diào)節(jié)pH,使樣品中不需要的化合物保留在固相萃取的填料上,而分析物則不被保留而流出。在適當(dāng)?shù)膒H,分析物的再次親水性和陽離子交換作用則能被利用。

吸附劑(如ENVI-Chrom P和ENVI-Carb)用于反相條件,則應(yīng)選擇pH,使分析物zui大程度地保留在反相硅膠上。一般使用有機(jī)溶劑洗脫時(shí),這一點(diǎn)上的pH無足輕重。令人吃驚的是,當(dāng)溶液在中性pH條件下,苯酚可帶電荷,它能更好的保留在ENVI-Chrom P上,而不是溶液在酸性pH,苯酚不帶電荷的情況。這表明,相對(duì)鍵合硅膠吸附劑對(duì)某些化合物有不同的選擇性。當(dāng)使用這類填料時(shí),應(yīng)對(duì)樣品和預(yù)處理溶液的pH范圍有所研究。

對(duì)于鍵合硅膠或吸附劑上的正相固相萃取過程,pH一般是無關(guān)重要的。因?yàn)樵谶@些過程中所用的溶劑一般為非極性有機(jī)溶劑,而不是水。

離子交換固相萃取是如何保留化合物,很大程度上取決于樣品和預(yù)處理溶液的pH。為了保留化合物,樣品的pH應(yīng)保證分析物和硅膠表面的官能團(tuán)帶上相反的電荷

杭州聚同電子有限公司
地址:杭州市余杭區(qū)南苑街道臨東路172號(hào)
郵箱:3217499191@qq.com
傳真:0571-86139537
關(guān)注我們
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)了解更多信息:
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)
了解更多信息
国产成人午夜精品一区二区三区| 乱lun岳80部分| 久久久久久精品国产三级| 久久影院午夜伦手机不四虎卡| 乱人伦人妻中文字幕无码 | 精品人妻av区| 国产av剧情md精品麻豆| 成人精品一区二区| 少妇与大狼拘作爱性a| 成人无码A级毛片免费| 香蕉人人超人人超碰超国产| 国产精品久久久久久无码| 久久精品国产99国产精品澳门| chinese妇女高潮白浆| www.久久久久久久| 国产在线精品无码不卡手机免费| 中文字幕乱码熟妇五十中出| 熟妇人妻无码中文字幕老熟妇| 亚洲有码区| 亚洲性猛交| 襄汾县| WWWW亚洲熟妇久久久久| 久久精品国产亚洲AV无码偷窥| 女人被爽到高潮视频免费国产| 日日夜夜综合| 会昌县| аⅴ中文在线天堂| 乱女伦露脸对白在线播放| 欧美一级黄片视频| 久久久久人妻一区精品色| 久久婷婷五月综合97色一本一本| 国产无人区卡一卡二卡三乱码| 中文字幕熟女av一区二区| 丁香综合| 兰坪| 影音先锋女人av鲁色资源网久久 | 久久婷婷六月综合色液啪| 国产精品夜间视频香蕉| 无码爽视频| 国产精品久久一区二区三区| 久久久久无码国产精品一区|